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Búsqueda : REACCION EN CADENA POR POLIMERASA [Descritor de assunto]
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Id:4748
Autor:Yábar V., Carlos; Montoya P., Ysabel.
Título:Síntesis in vitro de la proteína de la envoltura del virus peruano de la fiebre amarilla / In vitro synthesis of the envelope protein of the peruvian yellow fever virus
Resumen:Objetivo: Sintetizar la proteína recombinante de la envoltura (Er) del virus peruano de la Fiebre Amarilla (FA) utilizando técnicas moleculares. Materiales y métodos: El gen de la proteína de interés fue amplificado por transcripción reversa - reacción en cadena e la polimerasa (RT-PCR) y clonado en un vector plasmídico para ser analizado mediante secuenciamiento de ADN. El inserto de ADN fue subclonado en un vector de expresión para ser traducido a proteína. Se purificó la proteína mediante cromatografía de afinidad bajo condiciones denaturantes, siendo visualizada por electroforésis en SDS-PAGE.Resultados: Se sintetizó y purificó la pr E del virus de la FA. Presentó un peso de 66 kDa, y luego de tres horas de inducción a partir de 1x10 células (OD=0,5) se obtuvo 10mg/mL de la proteína a miniescala. Conclusión: El análisis de la secuencia de aminoácidos demostró que Er podría ser un buen candidato a ser evaluado serológicamente y luego usado como herramienta de diagnóstico específico para la FA.
Descriptores:FIEBRE AMARILLA
PROTEINAS/aislamiento & purificación
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA DE TRANSCRIPTASA REVERSA
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2001/a02v18n1-2.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. med. exp.;18(1-2):9-13, ene.-jun.2001.


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Id:4734
Autor:Yábar, C.; Carrillo, C.; Nolasco, O.; Montoya, Y..
Título:Diagnóstico temprano del virus dengue 1 usando RT-PCR y perspectivas para la caracterización molecular de cepas autóctonas / Early Diagnosis of Dengue 1 virus used RT-PCR and perspectives for the molecular caracterization of autoctons strains
Resumen:Un sistema de diagnóstico para la detección temprana del virus Dengue 1 fue llevado a cabo exitosamente usando la reacción en cadena por polimerasa de trnscriptasa reversa (RT-PCR), a través de la amplificación de una porción genómica del gen NS1. Los resultados obtenidos, a partir de muestras clínicas, corroboraron los datos de anteriores trabajos de RT-PCR dirigidos hacia la región estructural del virión. POsteriormente el ADNc del virus Dengue, correpondiente a una de las muestras serológicas, fue clonado y secuenciado. La comparación por ánalisis de secuencia nucleotídica con otras cepas referenciales determino que la cepa viral correspondía al serotipo 1.
Descriptores:DENGUE/diagnóstico
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA DE TRANSCRIPTASA REVERSA
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp1999/a05v16n1-2.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. med. exp.;16(1-2):31-34, 1999


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Id:4732
Autor:Guerrero, I.; Velazco, R.; Misad, O.; Pow-Sang, M..
Título:Oncogenes E6-E7 de los papilomavirus humanos de alto riesgo detectados por PCR en biopsias de pene incluidas en parafina / Oncogenes E6-E7 of the human papillomavirus of high risk detected by PCR in penile biopsia included in paraffin
Resumen:La alta prevalencia del papilomavirus humano (PVH), referida a nivel mundial, en lesiones genitales de ambos sexos, el rol del varón como reservorio pasivo del virus, y el incremento de la mortalidad por cáncer genital en la mujer en nuestro país, motiva la determinación y correlación de los oncogenes de los PVH de alto riesgo con la neoplasia de pene. Informamos de diez casos de biopsias de carcinoma escamoso de pene, incluidos en parafina, los cuales fueron investigados para la presencia de los oncogenes E6-E7 de PVH de alto riesgo, utilizando cebadores tipo específico para los PVH-16 y 18, mediante la reacción en cadena de polimerasa (PCR). El 40 por ciento de los casos mostró un producto de amplificación ADN E6-E7 de los PVH estudiados, correspondiendo el 75 por ciento de ellos a detección simple por PVH-18 y el 25 por ciento presentó mixta ADN E6-E7 del PVH-16 y 18 simultáneamente. El producto de amplificación fue sometido a comprobación por análisis de restricción específico. La prevalencia obtenida de los oncogenes E6-E7 de los PVH de alto riesgo, usando un método tan sensible como la PCR, apoya el rol de estos virus en el proceso de carcinogénesis de la neoplasia de pene.
Descriptores:ONCOGENES
PAPILLOMAVIRUS HUMANO
PENE
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp1999/a07v16n1-2.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. med. exp.;16(1-2):40-43, 1999


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Id:4724
Autor:Hijar, G.; Carrillo, C.; Padilla, C.; Cabezas Sánchez, César.; Suárez, M.; Romero, G.; Montoya, I..
Título:Estandarización de la PCR para el diagnóstico del virus de la hepatitis B en el Perú / Standardization of PCR for the diagnosis of hepatitis N virus in Peru
Resumen:La detección del ADN del virus de la Hepatitis B (VHB) es el marcador más sensible para determinar la replicación activa e infectividad del virus circulante. Por esta razón la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) fue aplicada satisfactoriamente usando primers específicos para gen del antígeno de superficie (HBsAg). Un frangmento de 260 bp fue amplificado in vitro apartir de 200 ul de sueros de pacientes aplicando PCR. La tecnología de PCR está siendo aplicada en el diagnóstico de pacientes infectados con el virus de la Hepatitis B pertenecientes a diferentes zonas geográficas.
Descriptores:HEPATITIS B
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA
PERU
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp1998/a06v15n1-2.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. med. exp.;15(1-2):30-33, ene.-dic. 1998


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Id:4723
Autor:Padilla, C.; Carrillo, C.; Barbara, Ellis; Ventura, G.; Montoya, Y..
Título:Detección de Bartonella bacilliformis usando PCR-RFLP / Detection of Bartonella bacilliformis using PCR-RFLP
Resumen:Reportamos la aplicación de las técnicas moleculares PCR-RFLP para la confirmación de infecciones por Bartonella bacilliformis. El método de PCR-RFLP se basa en la amplificación in vitro de un fragmento de 380 pb correspondiente al gen citrato sintetasa a partir de sangre y cultivos in vitro. El análisis del producto de amplificación por cortes con las enzimas restricción Hinfl y Taql permite caracterizar molecularmente que el brote ocurrido en Urubamba, Cuzo fue producido por Bartonella bacilloformis. Este método es aplicado directamente a sangre y a cultivos.
Descriptores:BARTONELLA
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp1998/a07v15n1-2.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. med. exp.;15(1-2):34-36, ene.-dic. 1998


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Id:4719
Autor:Nolasco, Oscar; Carrillo, Carlos; Gutierrez, Victoria.
Título:Diagnóstico temprano en un brote epidémico del virus dengue en Piura usando RT-PCR y NESTED-PCR / Early diagnosis test in a epidemic outbreak of dengue virus in Piura using RT and NESTED-PCR
Resumen:Un test de diagnóstico temprano (RT-PCR y Nested-PCR) fue evaluado y comparado con métodos convencionales (Cultivo in vitro, IFI y MAC-ELISA). Treinta y cuatro sueros de pacientes correspondientes de un brote epidémico de la costa norte peruana (Mancora, Piura) en mayo de 1997 fueron incluídos en este estudio. Todos los sueros obtenidos de pacientes que presentaron en los primeros cinco días manifestaciones clínicas siendo diagnosticados luego como dengue serotipo 1. Asimismo, RT-PCR permitió diagnosticar 82 por ciento de los sueros (28/34), sin embargo Mac-ELISA y cultivo in vitro reconocieron unicamente 41 por ciento de los sueros (14/34) y 38 por ciento de los sueros (13/34) respectivamente. Por lo tanto, el uso de esta herramienta molecular (RT-PCR y Nested-PCR) permitirá dar un diagnóstico temprano a estos pacientes y actuar inmediatamente ante la presencia de un brote epidémico.
Descriptores:DENGUE
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA DE TRANSCRIPTASA REVERSA
PERU
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp1997/a04v14n2.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. med. exp.;14(2):13-17, jul.-dic. 1997


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Id:4485
Autor:Montoya Piedra, Ysabel; Anaya Ramirez, Elizabeth; León Guevara, Carlos; >Nolasco Cárdenas, Oscar; Padilla Rojas, Carlos; Talledo Albujar, Michael; Velarde Vilchez, Mónica
Título:Aplicación de PCR en el diagnóstico clínico Application of PCR in clinical diagnosis-
Fuente:Lima; Instituto Nacional de Salud; 1996. [19] p. ilus.
Conferencia:Presentado en: Curso Teórico Práctico Aplicación de PCR en el diagnóstico clínico, Lima, 13-15 noviembre 1996.
Descriptores:REACCION EN CADENA POR POLIMERASA
DIAGNOSTICO CLINICO
Localización:PE14.1, INS-13


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Id:4481
Autor:Cáceres Rey, Omar; De los Santos Delgado, Mary; Douglas Gonzales, Susan; Hijar Guerra, Gyseli; Padilla Rojas, Carlos; Yabar Varas, Carlos; Montoya Piedra, Ysabel
Título:Electroforesis de ácidos nucleicos y PCR Electrophoresis of nucleic acids and PCR-
Fuente:Lima; Instituto Nacional de Salud; jul. 1999. 30 p. ilus.
Conferencia:Presentado en: Curso Teórico Práctico Electroforesis de Acidos Nucleicos y PCR, Lima, 12-16 julio 1999.
Descriptores:ELECTROFORESIS
ACIDOS NUCLEICOS
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA
Localización:PE14.1, INS-34


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Id:4431
Autor:Huguet T., José; Huapaya c., Blanca; Salazar L., Eduardo.
Título:Determinación de factores de virulencia asociados a Escherichia coli enterohemorrágica en cepas peruanas aisladas entre 1999-2001 / Determination of virulence factors related to Escherichia coli enterohemorragic Peruvian strain isolated between 1999-2001
Resumen:En el presente estudio se intentó detectar la presencia del gen de toxina shiga en cepas locales de Escherichia coli serológicamente relacionados a la categoría enterohemorrágica, caracterizando además un aislamiento reportado como serotipo 0157:H7 procedente de la ciudad de Tacna (cepa Tacna 410), mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y secuenciamiento. Los resultados confirmaron la presencia del gen de la toxina shiga sólo en la cepa Tacna410, obteniéndose una identidad del 100 por ciento entre la secuencia nucleotídica del gen de la cepa Tacna410 propiedades hemolíticas y el gen eae asociado al fenómeno de "attaching and effacing", características de una típica cepa de ECEH.
Descriptores:ESCHERICHIA COLI O157/genética
TOXINA SHIGA/genética
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA
PERU
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2002/a03v19n2.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud pública;19(2):63-67, abr.-jun. 2002


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Id:4398
Autor:Instituto Nacional de Salud (Perú)*.
Título:La biología molecular en la salud pública hacia el siglo XXI The molecular biology in public health toward Twenty century-
Fuente:Lima; s.n; 16 jul. 1999. 38 p. ilus.
Conferencia:Presentado en: Curso Teórico Práctico La Biología Molecular en la Salud Pública hacia el Siglo XXI, Lima, 16-20 julio 1999.
Descriptores:BIOLOGIA MOLECULAR
ACIDOS NUCLEICOS/metabolismo
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA
HIBRIDACION DE ACIDO NUCLEICO
Localización:PE14.1, INS-35


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Id:4338
Autor:Cáceres Rey, Omar; Montoya Piedra, Ysabel.
Título:Diseño y evaluación de tres oligonucleótidos para la detección de Leishmania por pcr / Design and evaluation of three olinucleotides for pcr detection of Leishmania
Fuente:Rev. peru. med. exp. salud publica;19(3):109-16, jul.-set. 2002. ilus, tab.
Resumen:La Leishmania afecta la salud pública en 88 países del mundo y representa un serio obstáculo para su desarrollo socioeconómico. Los métodos para diagnosticar la enfermedad toman tiempo y muchas veces son traumáticos para el paciente. Objetivo: Se aplicó PCR como método alternativo para el diagnóstico rápido de esta enfermedad. Materiales y métodos: A diferentes especies de Leishmania se les extrajo ADN genómico. Se diseñaron tres oligonucleótidos (LEISH 1, LEISH 2 y LEISH 3) dirigidos al extremo carboxilo terminal de la historia H2B de Leishmania (V.) peruaviana cuya secuencia parcial sirvió para diseñar dichos oligos, los cuales fueron probados en un sistema de PCR. Resultados: los oligonucleótidos amplificaron exitosamente regiones de 123 pb (LEISH 2) Y 139 pb (LEISH 1/LEISH 3) de esta secuencia parcial utilizada. La sensibilidad del PCR fue de hasta 1fg de ADN purificado de L (V.) peruviana y de 2 parásitos cuando se realizó la técnica de manera directa. La especificidad fue 100 por ciento (sólo reconoció a Leishmania y no a Trypanosoma ni a humano). Los oligonucleótidos diseñados también amplificaron todas las especies de Leishmania evaluadas. Conclusión: el sistema de PCR diseñado puede ser aplicado en la detección del parásito a partir de cualquier tipo muestra convirtiéndose en un método alternativo de diagnóstico de la enfermedad por su rapidez, especificidad y sensibilidad.
Descriptores:LEISHMANIASIS/diagnóstico
LEISHMANIASIS/genética
OLIGONUCLEOTIDOS/uso diagnóstico
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA/métodos
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2002/a02v19n3.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud publica;19(3):109-116, jul.-set. 2002


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Id:4335
Autor:Hijar, Gisely; Quino A., Higinio; Padilla R., Carlos; Montoya P., Ysabel.
Título:Variabilidad genética de plasmodium falciparum en pacientes con malaria grave y malaria no complicada en Iquitos - Perú / Genetic viability of plasmodium falciparum in patients with severe malaria and with non-complicated malaria in Iquitos-Peru
Resumen:Objetivo: Determinar la diversidad genética del gen que codifica la proteína rica en glutamato (GLURP) de Plasmodium falciparum en pacientes con malaria complicada y no complicada circulante en un área del departamento de Loreto, distrito de Maynas. Materiales y métodos: La diversidad genética fue analizada usando reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en 30 muestras sanguíneas de pacientes con malaria no complicada (MNC) y 46 con malaria grave complicada (MGC). Resultados: Ocho genotipos fueron detectados en pacientes con MNC (Genotipo I, II, III, IV, V, VI, VII y VIII y cuatro genotipos en los pacientes con MGC (Genotipo V, VI, VII, VIII). Asimismo, en 50 por ciento de las muestras con MNC fueron detectadas infecciones múltiples, a diferencia de las muestras de MGC en donde no se detectó infecciones múltiples. Conclusión: Existe una diversidad genética en esta región del gen GLURP de P. falciparum, para esa época (marzo 1998 - abril 1999) y esa área del país. En tal sentido, nuestros resultados podrían servir de base para llevar a cabo estudios epidemiológicos posteriores, ya que permitiría conocer la distribución de las cepas circulantes en nuestro país.
Descriptores:MALARIA
PLASMODIUM FALCIPARUM/genética
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA
PERU
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2002/a05v19n3.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud publica;19(3):131-135, jul.-set. 2002


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Id:4321
Autor:Padilla R, Carlos; Ventura E, Gladys.
Título:Diseño y estandarización de una prueba de PCR para el diagnóstico de la Bartonelosis causada por Bartonella bacilliformis / Design and standardization of a PCR test for the diagnosis of Bartonellosis produced by Bartonella bacilliformis
Fuente:Rev. peru. med. exp. salud publica;20(1):5-8, ene. -mar. 2003. ilus, tab.
Resumen:Objetivo: Diseñar una prueba de PCR para el diagnóstico de la Bartonelosis causada por Bartonella bacilliformis. Materiales y métodos: Se usó la secuencia de locus de invasión ialB para diseñar los oligonucleótidos ialBR, además del ADN genómico purificado de una cepa referencial de B. bacilliformis para estandarizar las condiciones de la prueba. Finalmente, la prueba fue preliminarmente evaluada con 12 cepas de B. bacilliformis aisladas en 3 áreas endémicas y 10 muestras de sangre total de pacientes con Bartonelosis.
Descriptores:INFECCIONES POR BARTONELLA/diagnóstico
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2003/a02v20n1.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud publica;20(1):5-8, ene. -mar. 2003


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Id:4315
Autor:Calderón, Roger; Asencios, Luis; Quispe, Neyda; Custodio, Walter; Montoya, Ysabel.
Título:Detección rápida de resistencia a drogas en Mycobacterium tuberculosis mediante PCR-SSCP y PCR-heteroduplex / Quick detection of Mycobacterium tuberculosis drug resistance using PCR-SSCP and PCR-heteroduplex
Fuente:Rev. peru. med. exp. salud publica;20(2):65-71, abr.-jun. 2003. ilus, tab.
Resumen:Objetivo: Detectar tempranamente la susceptibilidad a las drogas antituberculosas rifampicina e isoniacida mediante PCR y electroforesis conformacional. Materiales y métodos: Se implementaron dos ensayos de amplificación de los genes rpoB y katG y mediante Heteroduplex y SSCP se determino la susceptibilidad antituberculosa de 31 muestras clínicas procedentes de pacientes con diagnóstico de tuberculosis pulmonar baciloscopia positiva. La caracterización fenotípica de la susceptibilidad, se realizó empleando el método de las proporciones. Resultados: Los ensayos de PCR detectaron hasta 2,5 pg de ADN genómico de M. tuberculosis; no amplificando ADN de otras micobacterias y bacterias comunes de la flora bucal. Se encontró una concordancia general entre la detección molecular y convencional de la susceptibilidad a rifampicina e isoniacida de 96.7 por ciento y 83,9 por ciento (p<0,05), respectivamente. Sin embargo sólo en pacientes con antecedente de tratamiento se presentó una concordancia del 100 por ciento y 90,9 por ciento (p<0,05) para rifampicina e isoniacida, respectivamente. Además, este sistema de detección de resistencia puede emitir resultados 48 horas después de la recepción de la muestra clínica. Conclusiones: Estos sistemas se presentan como una excelente alternativa para la identificación temprana de pacientes infectados con bacilos de M. tuberculosis drogoresistentes. Potencialmente se podrán dirigir óptimos y oportunos esquemas terapéuticos que contribuiran con el control y prevención de la transmisión de cepas multidrogo-resistentes que afectan en gran medidad a la salud pública d nuestro país.
Descriptores:REACCION EN CADENA POR POLIMERASA
POLIMORFISMO CONFORMACIONAL RETORCIDO-SIMPLE
TUBERCULOSIS
RIFAMPIN
ISONIACIDA
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2003/a02v20n2.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud publica;20(2):65-71, abr.-jun. 2003


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Id:4308
Autor:Padilla R., Carlos; Ventura E., Gladis.
Título:Genotipificación de aislamientos de Bartonella bacilliformis por amplificación de elementos repetitivos mediante el uso de REP-PCR y ERIC-PCR / Bartonella bacilliformis isolates genotypying with repeated elements amplification with REP-PCR and ERIC-PCR
Fuente:Rev. peru. med. exp. salud publica;20(3):128-31, jul.-set. 2003. ilus, tab.
Resumen:Objetivos: Genotipificar los aislamientos de Bartonella bacilliformis a través de la amplificación de elementos repetitivos mediante el uso de ERIC-PCR y REP-PCR, y determinar si existe variabilidad genética entre aislamientos de varias zonas endémicas. Materiales y Métodos: Se evaluaron mediante el uso del ERIC-PCR y REP-PCR 17 aislamientos de B. bacilliformis de Lima, Cusco y Ancash. Los aislamientos fueron realizados durante los años 1998 y 1999. Para el análisis de los patrones de bandas se usó el software GelCompar 4,0. Resultados: Fueron identificados en los 17 aislamientos 10 genotipos. Los genotipos D, E y H fueron detectados en Cusco; mientras que los genotipos B, C, G, J e I en Lima; y el genotipo F en Ancash. Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que REP-PCR y ERIC-PCR son métodos útiles para genotipificar aislamientos de B. bacilliformis. La variabilidad genética debe ser tomada en cuenta en estudios epidemiológicos y clínicos de Bartonelosis; así como el desarrollo de nuevas técnicas diagnósticas y de vacunas.
Descriptores:BARTONELLA BACILLIFORMIS
REACCION EN CADENA POR POLIMERASA
INFECCIONES POR BARTONELLA
GENOTIPO
Medio Electrónico:http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2003/a03v20n3.pdf / es
Localización:PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud publica;20(3):128-131, jul.-set. 2003



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